液相色譜技術和制備色譜比較
隨著現(xiàn)代制藥行業(yè)的快速發(fā)展,藥物活性成分的分離日益受到關注和重視,而藥物活性成分的規(guī)模化分離制備色譜技術成為制約現(xiàn)代制藥行業(yè)發(fā)展的瓶頸。
色譜分離技術是最主要的分離純化技術之一,其已從分析規(guī)模發(fā)展到制備和生產(chǎn)規(guī)模,在藥物活性成分的分離純化中發(fā)揮了重要作用,并已發(fā)展成為大規(guī)模分離制備藥物特別是中藥活性成分的重要方法。
制備型高效液相色譜
液相色譜是將分離填料填裝在色譜柱內(nèi),以液體流動相進行洗脫,利用藥物不同活性成分與填料相互作用力的差異進行分離。在液相制備色譜分離中,一般將柱壓力低于0.5 MPa的稱為低壓制備色譜,壓力0.5-2 MPa的稱為中壓制備色譜,壓力>2 MPa的稱為高壓制備色譜。
低壓制備色譜通常有兩種模式,一種是在柱上方加壓,另一種是在柱下方減壓。除了加減壓外,其他的與經(jīng)典柱色譜法基本一致。減壓一般是用真空泵來完成,加壓一般用空氣泵氮氣鋼瓶蠕動泵等完成。在低壓制備色譜中使用的是顆粒較大的填料,因此其分辨率是有限的。
中壓制備色譜是利用恒流泵抽送流動相,帶著樣品流經(jīng)色譜柱,實現(xiàn)對樣品的分離。中壓制備色譜系統(tǒng)由溶劑瓶、恒流泵、進樣閥、色譜柱、檢測器、記錄儀和餾分收集器等部分組成。其色譜柱一般是由耐壓的強化玻璃制成,填料顆粒大小比低壓制備色譜所用填料小,分離效率更高。
高壓液相色譜又叫高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),是利用更細的高效填料進行分離的,具有高柱效、高流速、分離時間短的特點。與經(jīng)典液相色譜相比,高效液相色譜有很大不同,表1列出了一些不同之處。
雖然制備型的HPLC也有缺點,需要大量的溶劑,產(chǎn)品過于稀釋以及無法避免地使用有毒的有機溶劑,但是由于制備型HPLC的優(yōu)點比較突出,并且其分離模式多種多樣,故其在生產(chǎn)各個領域的應用相當廣泛。