流式細(xì)胞儀的應(yīng)用
流式細(xì)胞儀主要有兩個(gè)最基本的用途：第一是可以定量分析鑒定活細(xì)胞表面表達(dá)的特異分子，第二是進(jìn)行特定的活細(xì)胞群的分離和純化。
1. 免疫細(xì)胞群的分類靜止淋巴細(xì)胞之間從其外觀形態(tài)難以區(qū)分，都是以致密的核及少量細(xì)胞質(zhì)組成的小而圓的細(xì)胞為特征。然而，這些細(xì)胞確是由功能各異的不同細(xì)胞亞群所組成，各種細(xì)胞群表達(dá)各自特殊的表面分子。例如，B淋巴細(xì)胞上表達(dá)有特異的膜表面免疫球蛋白（mIg），而成熟的T淋巴細(xì)胞表面表達(dá)特異的CD3分子。T淋巴細(xì)胞又可進(jìn)一步按其表達(dá)的不同表面標(biāo)志細(xì)分成不同的亞群，如CD4+CD8-和CD4-CD8+亞群。因此，可由這些特征性的表面標(biāo)志，將細(xì)胞分為不同的群或亞群。
2. 免疫細(xì)胞的分化發(fā)育免疫細(xì)胞分化發(fā)育的不同階段，其表面標(biāo)志也在不斷地發(fā)生著變化。如胸腺細(xì)胞（發(fā)育過(guò)程中的T淋巴細(xì)胞），在發(fā)育的不同階段從不成熟到成熟，其表面標(biāo)志經(jīng)歷了從雙陰性（CD4-CD8-）到雙陽(yáng)性（CD4-CD8-），直到單陽(yáng)性（CD4+CD8-或CD4-CD8+）的過(guò)程。正常生理狀態(tài)下，發(fā)育不同階段的胸腺細(xì)胞以一定的比例存在于胸腺中。通過(guò)檢測(cè)這些標(biāo)志，即可判定某些因素（基因突變等）對(duì)胸腺細(xì)胞發(fā)育的影響。
3. 免疫細(xì)胞的分子表達(dá)免疫細(xì)胞的不同因素的影響下，其表達(dá)的分子也會(huì)發(fā)生變化。通過(guò)檢測(cè)這些分子的變化，可分析細(xì)胞功能以及細(xì)胞分化狀態(tài)等。例如，靜止的T淋巴細(xì)胞不表達(dá)或低水平表達(dá)CD69分子；而一經(jīng)活化，其表達(dá)CD69分子數(shù)量明顯增加。因此，可通過(guò)檢測(cè)這些活化標(biāo)志的變化來(lái)判定細(xì)胞狀態(tài)以及研究影響細(xì)胞活化狀態(tài)的因素。
4. 免疫細(xì)胞的分離如前所述，免疫細(xì)胞是一組極不均一的群體。所以在研究免疫細(xì)胞功能時(shí)，常常需要把某些特異的細(xì)胞分離和純化。雖然免疫細(xì)胞分離的方法很多，但用FACS來(lái)純化特定的細(xì)胞群是目前最為有效和方便的手段。例如，最近頗受關(guān)注的CD4+CD25+T淋巴細(xì)胞是一群具有免疫調(diào)節(jié)（免疫抑制）功能的細(xì)胞群。在對(duì)其特點(diǎn)及功能進(jìn)行研究時(shí)，首要的問(wèn)題是分離該細(xì)胞群。用相應(yīng)的單克隆抗體與其結(jié)合，再用FACS進(jìn)行分離，就能得到純度很高CD4+CD25+T淋巴細(xì)胞細(xì)胞群。而其他分離方法不僅分離過(guò)程煩瑣，也很難控制無(wú)菌條件及保證細(xì)胞純度。
